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ELISA原理:酶聯免疫吸附測定原理及應用方向
更新時(shi)間:2024-02-04瀏覽:926次

  ELISA原理:酶聯(lian)免疫吸(xi)附測定(ding)原理及(ji)應用方向


  酶聯免(mian)疫(yi)吸(xi)附(fu)測定簡介

  酶聯(lian)免(mian)疫吸附測定法(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay),簡稱ELISA,是(shi)(shi)(shi)實驗(yan)室常(chang)用(yong)(yong)的(de)(de)檢測方法。 酶是(shi)(shi)(shi)能夠催(cui)(cui)化(hua)化(hua)學反(fan)應的(de)(de)特(te)殊蛋(dan)白(bai)質,其催(cui)(cui)化(hua)效力超過目(mu)前所有人造(zao)催(cui)(cui)化(hua)劑。ELISA是(shi)(shi)(shi)將酶催(cui)(cui)化(hua)的(de)(de)放大作(zuo)用(yong)(yong)與特(te)異性抗(kang)(kang)原抗(kang)(kang)體反(fan)應結(jie)合起來的(de)(de)一種(zhong)微量分(fen)析技(ji)術。酶標記(ji)抗(kang)(kang)原或抗(kang)(kang)體以(yi)后(hou),既不影(ying)響抗(kang)(kang)原抗(kang)(kang)體反(fan)應的(de)(de)特(te)異性,也不改(gai)變(bian)酶本(ben)(ben)身的(de)(de)活性。因(yin)此ELISA具有準確性高、檢測時(shi)間短、價格低廉、判(pan)斷結(jie)果有客觀標準、結(jie)果便于(yu)記(ji)錄和保存等優點(dian),適合于(yu)大批標本(ben)(ben)的(de)(de)檢測,廣泛應用(yong)(yong)于(yu)食品安全檢測、醫療檢測以(yi)及(ji)免(mian)疫實驗(yan)分(fen)析等領域。


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  酶聯(lian)免疫(yi)吸附測定原(yuan)理

  ELISA必須遵(zun)守以下3個(ge)核心原理:

  1)抗原或抗體能吸附于固相載體表面(mian),并保持(chi)其免疫學活性(xing);

  2)抗原或抗體(ti)可通(tong)過共(gong)價鍵與酶(mei)連接形成酶(mei)結(jie)合物,而(er)此種(zhong)酶(mei)結(jie)合物仍能保持其免疫學(xue)和酶(mei)學(xue)活性;

  3)酶(mei)結(jie)合物與相應(ying)抗(kang)(kang)原(yuan)或抗(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)結(jie)合后,可(ke)(ke)根(gen)據(ju)加入底物的(de)(de)(de)顏(yan)色反(fan)應(ying)來判定(ding)是(shi)否有(you)免(mian)疫反(fan)應(ying)的(de)(de)(de)存在(zai),而且顏(yan)色反(fan)應(ying)的(de)(de)(de)深(shen)淺(qian)是(shi)與標本中(zhong)(zhong)相應(ying)抗(kang)(kang)原(yuan)或抗(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)量(liang)成正(zheng)比例的(de)(de)(de),可(ke)(ke)根(gen)據(ju)已知濃度的(de)(de)(de)抗(kang)(kang)原(yuan)或抗(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)顏(yan)色反(fan)應(ying)的(de)(de)(de)深(shen)淺(qian)繪(hui)制(zhi)標準曲(qu)線并依此計(ji)算(suan)出未知樣品中(zhong)(zhong)抗(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)或抗(kang)(kang)原(yuan)的(de)(de)(de)濃度。在(zai)ELISA中(zhong)(zhong)酶(mei)起(qi)到很(hen)關鍵(jian)的(de)(de)(de)作(zuo)用(yong),常用(yong)于ELISA法的(de)(de)(de)酶(mei)有(you)辣(la)根(gen)過氧化物酶(mei),堿性磷酸酯酶(mei)等(deng),其中(zhong)(zhong)尤以辣(la)根(gen)過氧化物酶(mei)為(wei)多。酶(mei)結(jie)合物是(shi)酶(mei)與抗(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)或抗(kang)(kang)原(yuan), 半抗(kang)(kang)原(yuan)在(zai)交聯劑作(zuo)用(yong)下聯結(jie)的(de)(de)(de)產(chan)物,它(ta)不(bu)僅具(ju)有(you)抗(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)抗(kang)(kang)原(yuan)特異的(de)(de)(de)免(mian)疫反(fan)應(ying),還能催(cui)化酶(mei)促反(fan)應(ying),顯(xian)示出生物放(fang)大作(zuo)用(yong)。

  酶聯免(mian)疫吸附(fu)測定(ding)應用方(fang)向

  ELISA應(ying)用(yong)的(de)范圍(wei)很廣,而且正在不斷(duan)地擴大(da),原則上(shang)ELISA可(ke)(ke)用(yong)于檢測(ce)一切抗(kang)原、抗(kang)體及(ji)半抗(kang)原,可(ke)(ke)以直接定量測(ce)定體液(ye)中的(de)可(ke)(ke)溶(rong)性抗(kang)原。在實際應(ying)用(yong)方面(mian)可(ke)(ke)用(yong)于疾(ji)(ji)病(bing)的(de)臨床診斷(duan)、疾(ji)(ji)病(bing)監察、疾(ji)(ji)病(bing)普查(cha)、法醫(yi)檢查(cha)、獸醫(yi)及(ji)農業上(shang)的(de)植物(wu)病(bing)害的(de)診斷(duan)檢定等。因此,它和生(sheng)物(wu)化學(xue)、免疫學(xue)、微生(sheng)物(wu)學(xue)、藥理學(xue)、流行病(bing)學(xue)及(ji)傳染病(bing)學(xue)等方面(mian)密切相關。按照待測(ce)物(wu)性質的(de)不同,ELISA反應(ying)可(ke)(ke)以分(fen)為抗(kang)原檢測(ce)反應(ying)及(ji)抗(kang)體檢測(ce)反應(ying)。

  ELISA試劑盒 本生(sheng)一直(zhi)視質(zhi)量控制為(wei)企業(ye)(ye)的(de)(de)生(sheng)命,追求企業(ye)(ye)競(jing)爭力的(de)(de)不斷提(ti)升。公司在經營中始終秉承(cheng):遵(zun)紀守法,嚴(yan)于律(lv)己,寬仁(ren)以待,敢于承(cheng)擔的(de)(de)企業(ye)(ye)精神(shen)作為(wei)標(biao)準,以過硬(ying)的(de)(de)質(zhi)量和優良的(de)(de)服務來(lai)維護和拓展(zhan)市場,較大限度的(de)(de)滿(man)足客戶的(de)(de)需(xu)求。與客戶的(de)(de)共贏,是我們的(de)(de)發展(zhan)目標(biao)。本生(sheng)!您信(xin)任的(de)(de)合作伙伴。我們愿與您真誠(cheng)合作,共創(chuang)美好(hao)的(de)(de)未來(lai)。

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